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產品說明：

產品描述

溶核糖核酸酶A（Ribonuclease A，常用縮寫RNase A），一種含4個二硫鍵的單鏈多肽，分子量約為13.7 kDa（氨基酸序列）。作為一種核糖核酸內切酶（endoribonuclease），特異性降解單鏈RNA上的胞嘧啶（C）或尿嘧啶（U）殘基。具體來說，切割識別的是由某核苷酸上的5’-核糖和相鄰的嘧啶類核苷酸3’-核糖上磷酸基團形成的磷酸二酯鍵，從而使得2’, 3’-環磷酸水解為對應的3’-核苷磷酸（比如，pG-pG-pC-pA-pG經RNase A切割產生pG-pG-pCp 和A-PG）。RNase A切割單鏈RNA活性最高，推薦工作濃度為1-100 μg/mL，兼容于各種反應體系。低鹽濃度（0-100 mM NaCl），可用來切割單鏈RNA，雙鏈RNA，以及RNA-DNA雜交形成的RNA鏈。然而，高鹽濃度（≥0.3 M），RNase A僅特異性切割單鏈RNA。

核糖核酸酶A（RNase A）最常見的應用在于質粒DNA或基因組DNA制備過程中去除RNA，此制備過程中DNase酶活性的存在與否是需要重視的污染之一，可采用水浴煮沸這種傳統方法來滅活DNase活性。另外，本品還可用于RNA酶保護分析、RNA序列分析等分子生物學實驗。

儲存液制備

注意：此為RNase A儲存液配制的常用方法之一，也可以根據實驗室傳統的方法，或者參考文獻資料使用其他方法制備儲存液（如直接溶于10 mM Tris-Cl, pH7.5或者Tris-NaCl溶液）。

1）利用10 mM的醋酸鈉（pH5.2）制備10 mg/mL 的RNase A 儲存液；

2）100℃加熱15 min；

3）冷卻到室溫，加入1/10體積的1 M Tris-HCl（pH7.4），調其pH至7.4（如：5 mL 10 mg/mL的RNase 儲存液加入500 μL 1 M Tris-HCl, pH7.4）；

4）分裝于-20℃凍存，可穩定保存長達2年。

注意：在中性條件下煮沸RNase A溶液，會有RNase沉淀形成；在更低的pH下將其煮沸，如有沉淀可以觀察到，可能由于蛋白雜質存在造成。煮沸之后若發現沉淀，可通過高速離心（13,000 rpm）去除雜質，然后分裝凍存。

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注意事項：

1）RNase A會強吸附在玻璃器皿上，建議溶液裝到塑料離心管內。

2）對于同時操作完整RNA實驗的研究人員，一定要謹防RNase A引入干擾試驗結果的準確性。

3）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

本產品僅供科研使用，不可用于臨床診斷應用或其他用途。