FITC-Dextran 70 (FD70) FITC標記葡聚糖(70 kDa)
產品描述
FITC標記葡聚糖(FITC-Dextran)是以天然葡聚糖B512F限制水解和分級純化制備的不同分子量葡聚糖為底物,經熒光素標記所得的合成探針。熒光素基團通過一個穩定的硫代氨甲酰鍵連接到葡聚糖上(見附錄圖1. FITC-Dextran分子片段的結構特征),此標記步驟不會引起任何的葡聚糖降解。FITC-Dextran內每個葡萄糖單位含0.002~0.008 mol FITC,這一低水平的替換確保葡聚糖最小的結構變化,這一特性對滲透性研究來說是最基本需求。
FITC標記葡聚糖(FITC-Dextran)廣泛用于微循環和細胞通透性研究,通過熒光顯微測定法來檢測。還可用于植物細胞壁多孔性和毛細血管通透性研究。小分子量的FITC-Dextran也能用來測定比如內吞和細胞連接通透性的生理過程。FITC-Dextran 70 (FD70)可能用作一種模式化合物來開發輸送分子到原生質體的方法,或者用來研究水凝膠和脂質體等結構內的藥物釋放過程。也許還能用在微血管和單細胞層通透性研究。血漿蛋白不會結合FITC-Dextran。
本品是對平均分子量約70kDa葡聚糖進行標記的熒光素衍生物,即異硫氰酸熒光素葡聚糖70(fluorescein isothiocyanate dextran 70, FITC-dextran, FD70),以凍干粉形式提供,易溶于水,最大激發和發射波長分別為493和518nm。
產品特性
1) CAS NO:60842-46-8
2) 化學名:Dextran(3′,6′dihydroxy-3-oxospiro(isobenzofuran-1(3H),9′-[9H]xanthen]-5(or 6)-yl)carbamothioate
, average Mw of approximately 70,000
3) 同義名:Fluorescein isothiocyanate-dextran 70; Fluoresceinyl thiocarbamoyl-dextran 70;
4) 分子量:average Mw 59,000-77,000
5) 置換率:0.002~0.008 mol FITC/glucose unit
6) 外觀:黃色至深橘色粉末
7) 溶解性:易溶于水或鹽溶液,也溶于DMSO,甲酰胺和某些其他極性有機溶劑,不溶于更低的脂肪醇、丙酮、氯仿和二甲基甲酰胺(DMF)
8) 光譜特性:Ex/Em=493/518nm【由于熒光素基團的電荷狀態依賴于緩沖液的pH和離子強度,因此熒光強度也會因這些參數的變化而變化。pH>8觀察到最大熒光強度。生理緩沖液能顯著影響熒光強度,或得到增加或受到抑制。見附錄圖2. pH 4-9范圍內FITC-Dextran 70的熒光變化(Em=520nm)】
保存與運輸方法
保存:室溫避光短期保存,2-8℃避光長期保存,保持密封干燥,至少3年穩定。
運輸:室溫運輸。
產品穩定性
綜合各種溶液體系和溫度下FITC-Dextrans的穩定性測定,總的來說,體內外FITC-Dextrans的穩定性非常優秀。僅當pH>9和上升溫度內熒光素可能存在水解的風險。兔血漿、肌肉勻漿液、肝臟勻漿液和尿液內的FITC-Dextrans在37℃,至少3天內保持穩定,分子量不會發生變化,且未發現熒光素基團的釋放。6%三氯乙酸內FITC-Dextrans室溫穩定保存3天。【文獻來源:P. Kurtzhals, C. Larsen and M. Johansen, High performance size-exclusion chromatographic procedure for the determination of fluoresceinyl isothiocyanate dextrans of various molecular masses in biological media. J Chromatogr, 491(1989), 117-127.】
硫代氨甲酰鍵的水解產生4-或5-氨基熒光素,能立即被HPLC定量檢測到。未發表的研究數據顯示,將高壓處理的FITC-Dextran 70溶液置于8-50℃長達5個月,發現僅在50℃情況下可能觀察到微量(1%)的自由氨基熒光素含量增加。單獨進行高壓處理會引起2.7%的自由氨基熒光素產生。
其他的未發表研究顯示,FITC-Dextran在pH4溶液35℃內能穩定保存高達1年。而在pH4,80℃內硫代氨甲酰鍵穩定30min,可能觀察到葡聚糖的降解。pH9,35℃內存放一個月以上會發生一定量(24%)的熒光衰減。
一些研究證明,FITC-Dextrans在持續性實驗(1-6天)的體內穩定性。【文獻來源:N. Thorball, FITC-dextran tracers in microcirculatory and permeability studies using combined fluorescence Stereo Microscopy, Fluorescence Stereo-microscopy and electron microscopy, Histochemistry, 71(1981), 209-233.】
注意事項
1) FITC-Dextrans易溶于水或鹽溶液,可根據實際使用濃度配制適當濃度的母液。
2) FITC-Dextrans溶液高壓滅菌可能導致少量氨基熒光素的釋放,若需要無菌,建議用過濾的方法來除菌。
3) 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
附錄

圖1. FITC-Dextran分子片段的結構特征
圖2. pH 4-9范圍內FITC-Dextran 70的熒光變化(Em=520nm)







